【原创慎转】 褐藻酸寡糖的含量今天测了吗？（羧基转化滴定法操作细节分享）

发布时间：2024-12-06 11:34:44

褐藻酸寡糖，又称褐藻寡糖，是从海带、巨藻等褐藻中通过高效特定专用酶等先进工艺技术，获得的天然降解产物，广泛应用于医药、饲料、农业、日化等领域。伴随着市场不断增长的需求和使用，简单、准确、易操作的褐藻酸寡糖含量测定方法迫在眉睫。

由青岛和海生物科技有限公司、博智汇力生物科技公司提出，中国海洋大学等十几家科研院所及褐藻酸寡糖生产企业共同参与制定的《褐藻酸寡糖含量的测定》标准，于今年8月份由中国标准化协会正式发布！

对比之前的各企业或地方标准，本标准采用了羧甲转化滴定法测定褐藻酸寡糖的含量，不仅适用于各种产品中褐藻酸寡糖含量的测定，还具有三大“无需”优势：一是，无需将褐藻酸寡糖降解为单糖，避免了降解程度难以控制和对含量测定结果的影响；二是，无需使用单糖或者寡糖对照品，而且不同M/G比值不影响含量测定结果；三是，无需绘制标准曲线，可实现褐藻酸寡糖含量的快速定量分析。

下面手把手教您如何操作：

1、 样品取用量

样品取用质量推荐0.5 g左右，最小不低于0.25 g。当取样质量发生变化时，应注意以下两点：

l 当取样量变小时，调节pH前溶解样品的溶剂含量需相应减少。当样品浓度降低时，溶液离子强度会变低，容易造成pH调节波动大、不稳定，影响最终含量结果。

l 灰化结束后复溶的定容体积或滴定时取样体积也应同步改变。当取样量降低时，应减小定容体积或增大滴定取样体积，以确保用于滴定的碳酸盐含量不会过低，否则会造成测定结果偏低。

2、 转化注意事项

l 用氢氧化钠溶液将样品溶液pH调至10.0，而且需稳定在10.0且保持15 min以上无变化，才能使羧基转化完全。

l 使用盐酸溶液将pH由10调至8时，若没控制好盐酸溶液用量，溶液pH已变为8以下时，不可直接用氢氧化钠溶液再将pH回调至8。而是需重新用氢氧化钠溶液将pH调至10，稳定后再用盐酸溶液少量多次将pH调至8。待溶液pH稳定后才能使羧基转化完全，否则测定结果会偏低。

3、 炭化注意事项

l 炭化过程易发生溶液喷溅，应注意温度不易过高，需缓慢加热蒸干，避免溶液喷溅。

l 推荐使用鼓风干燥箱先将溶液蒸干后，再使用电热炉将样品炭化。

l 此过程建议使用100 mL大坩埚，当液体发生喷溅时检测结果会偏低。

4、 灰化注意事项

l 高温炉中灰化4 h后，如灼烧残渣有炭粒，需滴入少许水湿润，蒸干水分后再次灼烧直至无炭粒才算灰化完全。

l 灰化终产物为碳酸盐，灰化不完全会导致滴定结果偏低。

5、 滴定注意事项

需选择合适的滴定管量程和盐酸标准溶液浓度。

l 严格按照本法的取样质量、定容体积、滴定取样体积时，含量结果为97%的AOS所消耗的0.01 mol/L盐酸标准溶液的体积约为12 mL左右，使用的酸式滴定管量程为25 mL。如滴定管量程和盐酸标准溶液浓度选择不当，半滴的滴定液体积可能会造成含量结果2-5%的波动。

l 如条件允许，可直接采购市售的0.01 mol/L的盐酸标准溶液。

l 滴定终点无法判断甲基橙颜色变化时，可结合pH判定滴定结果判断。滴定终点pH值约在3.8-4.0之间。