甘露糖醛酸寡糖对H2O2诱导衰老心肌细胞的影响

发布时间：2019-12-20 17:35:16

甘露糖醛酸寡糖是褐藻寡糖的一种，由褐藻胶加工而成，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物学活性，有重要的临床应用价值。本实验采用H2O2诱导建立心肌细胞衰老模型，探讨甘露糖醛酸寡糖对衰老心肌细胞的保护作用。

试验设5组：对照组（A组），H2O2组（B组），H2O2＋甘露糖醛酸寡糖（M3K）低剂量组（C组），H2O2组＋甘露糖醛酸寡糖（M3K）中剂量组（D组），H2O2＋甘露糖醛酸寡糖（M3K）高剂量组（E组）。当细胞融合度达50%时，B组、C组、D组和E组细胞分别加入100μmol/L的H2O2诱导建立衰老模型，4小时后更换新鲜DMEM完全培养液。H2O2组继续培养48小时，甘露糖醛酸寡糖（M3K）干预各组分别加入10、50、100mg/L的甘露糖醛酸寡糖（M3K）培养48h。检测各心肌细胞数量、各组心肌细胞P21和P53蛋白表达比较、各组细胞beclin1、Atg7和LC3-ⅡmRNA表达比较。结果，培养48小时后，B组（H2O2组）细胞数量与对照组相比明显减少；甘露糖醛酸寡糖（M3K）干预各组细胞数量与H2O2组相比呈剂量依赖性增加，C组、D组、E组细胞数量分别比B组增加51.3%、82.2%、97.4%。与对照组相比，B组（H2O2组）心肌细胞P21和P53蛋白表达显著增加；甘露糖醛酸寡糖（M3K）干预48小时后，各组心肌细胞P21和P53蛋白表达随甘露糖醛酸寡糖（M3K）浓度的增加而降低，C组、D组、E组P21蛋白表达比分别比B组降低了20.0%、29.3%、40.3%；P53蛋白比分别比B组降低了30.2%、51.2%、62.2%。与对照组相比，H2O2组心肌细胞beclin1、Atg7和LC3-ⅡmRNA表达水平显著降低；甘露糖醛酸寡糖（M3K）干预48小时后，各组心肌细胞beclin1、Atg7和LC3-ⅡmRNA表达呈浓度依赖性增加，C组、D组、E组beclin1表达分别比B组增加了35.9%、78.0%、132.6%；Atg7表达分别比B组增加了62.6%、96.4%、192.8%；LC3-ⅡmRNA表达分别比B组增加了18.7%、45.3%、90.4%。

试验结果表明，H2O2诱导了心肌细胞内氧化应激，引起细胞衰老，衰老后表现为细胞周期阻滞，增殖减少。甘露糖醛酸寡糖（M3K）干预衰老细胞48小时可使P21和P53蛋白表达下调，缓解衰老心肌细胞的细胞周期阻滞，增殖加快，进而延缓心肌细胞衰老。甘露糖醛酸寡糖（M3K）处理后，细胞中的自噬相关基因beclin1、Atg7和LC3-ⅡmRNA表达增加，表明甘露糖醛酸寡糖（M3K）延缓心肌细胞衰老可能与自噬激活有关。

文章源自《甘露糖醛酸寡糖对H2O2诱导衰老心肌细胞的影响》