壳寡糖含量的检测方法

发布时间：2014-03-31 11:28:44

  壳寡糖在酸性条件下水解成为D-氨基葡萄糖，因此，可以通过测定氨基葡萄糖的含量来表示壳寡糖的含量。

  目前，测定壳寡糖含量的主要方法有：Elson-Morgan(乙酰丙酮法)、苯酚-硫酸法、3,5-二硝基水杨酸（DNS）法、Imoto比色法。

  1、 Elson-Morgan(乙酰丙酮法)

  Elson-Morgan是经典的测定氨基葡萄糖的方法，且对氨基葡萄糖有很好的专一性。其原理为：乙酰丙酮碱性溶液将氨基葡萄糖分子2号碳位上的氨基乙酰化，生成生色原2－甲基－3－二乙酰吡咯衍生物，生色原与对二甲氨基苯甲醛在酸性条件下呈红色。在波长525 nm时测吸光度，氨基葡萄糖的浓度与吸光度呈线性关系。

  2、 苯酚-硫酸法

  苯酚-硫酸法是常用的测定寡糖、多糖含量的方法，但是苯酚-硫酸法中氨基糖的显色较浅，测定值较加样值偏大一些，在实际应用中可乘上一个校正系数从而应用于壳寡糖含量的测定。

  3、3,5-二硝基水杨酸（DNS）法

  DNS法是一种常用的测定还原糖的方法。DNS法的测定原理为：含有自由基醛基或酮基的还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其他产物，3,5-二硝基水杨酸则被还原成棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系。

  4、Imoto比色法

  Imoto比色法显色效果好，可以用于测定氨基糖与乙酰氨基糖的混合体系。Imoto比色法的原理是：黄绿色的铁氰酸离子在碱性条件下能被还原糖还原成微黄色的亚铁氰酸离子。若反应中铁氰化钾过量，还原糖含量与生产的亚铁氰化钾的浓度呈正比关系，与反应液的颜色呈反比关系。