为研究壳寡糖对三疣梭子蟹免疫功能的影响,设置了含壳寡糖0.0、0.5、1.0、1.5和2.0 g/kg(分别为T0、T1、T2、T3和T4组)的5组试验饲料饲喂三疣梭子蟹,分别在第10d、20d和30d取血清进行酚氧化酶(PO)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、溶菌酶(LSZ)和过氧化物酶(POD)活性的测定,试验结束时测定血细胞的密度。
1、壳寡糖对三疣梭子蟹细胞种类和数目的影响
壳寡糖对三疣梭子蟹血淋巴中血细胞密度和种类含量的影响见表1。三疣梭子蟹血细胞总数:小颗粒细胞最多,大约占83.7%,大颗粒细胞次之,约占细胞总数的13.6%,无颗粒细胞最少,约占2.7%。在基础饲料中添加壳寡糖后可以显著地增加血细胞的密度(P<0.05)。当壳寡糖添加量为1.0 g/kg时血细胞浓度最大,另外壳寡糖对血淋巴中3种血细胞的比例产生一定的影响,随着壳寡糖浓度的增加小细胞所占的比例先逐渐升高,当壳聚糖添加量为1.5g/kg时又有所降低,与对照组相比差异不显著(P>0.05)。大颗粒细胞不断增加(P>0.05),随着壳寡糖添加量的增加无颗粒细胞所占的比例则不断减少(P>0.05)。
2.1壳寡糖对三疣梭子蟹ACP活力的影响
如图1所示,在基础饲料中添加壳寡糖后,试验组三疣梭子蟹的ACP活力显著提高,随着壳寡糖添加量的增加,ACP活力先逐渐提高,壳寡糖添加量超过1.5 g/kg后ACP活力有所回落,但均显著高于对照组(P<0.05),T3组与对照相比差异性极显著(P<0.01)。
2.2壳寡糖对三疣梭子蟹AKP活力的影响
如图2所示,随着壳寡糖添加量的增加可以使三疣梭子蟹血淋巴中AKP的活力逐渐升高,与对照相比差异不显著(P>0.05),其中T3、T4组AKP活力较高,另外随着饲喂时间的延长,试验组三疣梭子蟹的AKP活力缓慢升高。
2.3壳寡糖对三疣梭子蟹T-SOD活力的影响
如图3所示,在基础饲料中添加壳寡糖可以提高三疣梭子蟹血淋巴的T-SOD活力(图3),但是随着壳寡糖添加量的增加T-SOD活力有所回落,与对照组相比试验组T-SOD有显著性提高(P<0.05),其中T2、T3组促进效果最好,两者无显著差异(P>0.05)。
2.4壳寡糖对三疣梭子蟹POD活力的影响
如图4所示,在基础饲料中添加壳寡糖可以显著地促进三疣梭子蟹血淋巴中的POD活力,试验组与对照组相比差异显著(P<0.05),试验组中T3组POD活力最高。与第10天相比随着饲喂时间的延长各试验组的POD活力无显著变化。
2.5壳寡糖对三疣梭子蟹LSZ活力的影响
如图5所示,添加壳寡糖可以促进三疣梭子蟹血淋巴中溶菌活力的提高,用添加了壳寡糖的饲料饲喂三疣梭子蟹10d后,与T0组相比试验组溶菌活力明显提高,其中T1、T2、T3组与对照相比显著提高(P<0.05),而T4组与对照组无显著差异(P>0.05)。各试验组溶菌活力在第20天达到最大,随后又有所回落。
2.6壳寡糖对三疣梭子蟹PO活力的影响
如图6所示,在基础饲料中添加壳寡糖可以不同程度的提高三疣梭子蟹血淋巴的PO酶活,统计分析显示,与T0组相比试验组PO活力无显著性差(P>0.05)。试验组中T2组对三疣梭子蟹血淋巴的PO促进效果最好。另外随着饲喂时间的持续,试验组PO活力呈上升趋势(P>0.05)。
结果显示,在基础饲料中添加适量的壳寡糖可以显著性提高ACP、T-SOD、LSZ、POD活力(P<0.05),对PO和AKP活力促进效果不显著(P>0.05)。壳寡糖可以显著提高三疣梭子蟹血细胞密度(P<0.05),对3种血细胞所占比例有一定的影响(P>0.05)。综合考虑,T2、T3组对三疣梭子蟹免疫促进效果较好,建议基础饲料中壳寡糖添加量为1.0~1.5 g/kg。