壳寡糖减弱乙醇对胚胎肝细胞损伤的研究

发布时间：2017-10-18 09:22:41

本实验研究了壳寡糖保护人胚胎肝细胞抵制乙醇的损伤,并通过分子生物学的方法研究了保护的原因,为寻找新的保护肝脏的药物提供了实验学依据。

1.壳寡糖对乙醇损伤L02细胞的保护

壳寡糖和乙醇共处理L02细胞24,48,72 h后,MTT结果显示(表1),随着壳寡糖浓度增加和保护时间的延长,壳寡糖能明显降低乙醇对L02细胞的损伤(P<0.01),尤其是0.2 mg/mL的壳寡糖能够更好的起到保护作用,而高浓度(0.5 mg/mL)的壳寡糖并没有抑制细胞的生长,证明壳寡糖对L02细胞是无毒的。

2.壳寡糖下调p53基因的表达

为解释壳寡糖保护L02细胞抵制乙醇的损伤,检测了基因p53的变化情况,如图1所示,壳寡糖能够明显下调p53基因的表达

3.壳寡糖抑制乙醇引起的p53蛋白上调

壳寡糖诱导p53基因下调,那么它对p53蛋白表达是否会产生同样的影响呢?通过Western blot的结果分析可见,0.2 mg/mL壳寡糖能明显抑制乙醇引起的p53蛋白上调(图2)。这也就进一步解释了壳寡糖能够保护L02细胞抵制乙醇损伤的原因

近年来,我国由酒精所致肝损害的发病率呈逐年上升趋势,寻找好的保肝药物具有实际意义。据报道,壳寡糖在体内和体外都具有良好的抗氧化性,这能够缓解酒精带来的氧化压力,但是壳寡糖保护肝脏的分子机理并不十分清楚。本实验采用乙醇损伤人胚胎肝细胞的模型,研究了壳寡糖体外保护肝细胞抵制乙醇损伤的分子机理,壳寡糖能够下调p53的表达。p53属于促凋亡蛋白,在细胞凋亡途径中发挥着重要的作用。有文献报道乙醇可以诱导肝细胞的凋亡,而细胞凋亡是乙醇损伤肝细胞的具体表现,壳寡糖可能正是通过下调了肝细胞p53的表达,进而间接的减弱了乙醇引起的肝细胞凋亡的发生,起到了保护肝细胞的作用。